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    《南京醫科大學》 2019年
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    GLP-1抑制主動脈瓣膜間質細胞鈣化的實驗研究

    戴亞偉  
    【摘要】:【目的】探討胰高血糖素樣肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)對主動脈瓣間質細胞(valvular interstitial cells,VICs)表型轉化的影響,提示GLP-1在鈣化性主動脈瓣疾病(Calcific Aortic Valve Disease,CAVD)所起的保護性作用。【方法】膠原酶消化法分離并培養豬主動脈瓣膜間質細胞,用高鈣(2.8mmol/L),高磷(2.0mmol/L)法刺激建立主動脈瓣間質細胞鈣化模型。采用不同濃度的GLP-1分別刺激24h(GLP-1含量分別為0ng/ml、25ng/ml、50ng/ml、100ng/ml、200ng/ml、400ng/ml),通過檢測細胞裂解液中鈣離子濃度確定最佳濃度。用最佳刺激濃度刺激細胞12h、24h、48h、72h,同樣通過檢測細胞裂解液中鈣離子濃度確定最佳干預時間。我們采取最佳的刺激濃度刺激細胞達到最佳干預時間,提取RNA及蛋白,通過RT-PCR以及Western blot分別測定骨化相關指標骨橋蛋白(OPN),Runt相關轉錄因子2(Runx-2)的表達情況以及相關信號通路蛋白p65,p38,ERK,JNK的表達情況。【結果】GLP-1作用導致細胞裂解液鈣離子濃度降低且最適刺激濃度為200ng/ml,最佳刺激時間為24h。相比于對照組,GLP-1干預組OPN,Runx-2m RNA和蛋白表達都降低。GLP-1通過抑制p65,p38兩條信號傳導通路從而抑制鈣化。【結論】我們的研究顯示GLP-1可通過抑制p65,p38活化從而抑制主動脈瓣膜間質細胞的鈣化,為臨床上抑制主動脈瓣鈣化提供了新的理論依據。
    【學位授予單位】:南京醫科大學
    【學位級別】:碩士
    【學位授予年份】:2019
    【分類號】:R54

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